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使用細(xì)胞凍存液,你需要注意這些事項(xiàng)!

更新時(shí)間:2021-06-30   點(diǎn)擊次數(shù):1665次
  為了將每一種有生命的細(xì)胞較好的保存其原有的細(xì)胞特性或者長(zhǎng)久的保存種質(zhì)資源,實(shí)驗(yàn)人員往往將細(xì)胞用特殊配置的細(xì)胞凍存液保存,使得細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài),等到實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)候再?gòu)囊旱腥〕鰪?fù)蘇應(yīng)用。
 
  細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞健康程度一般要求活細(xì)胞在95%以上,細(xì)胞活力差的在凍存后的成活機(jī)率很小,因此,一定要在細(xì)胞旺盛分裂時(shí)期凍存。凍存液凍存需要一段時(shí)間,如果這段時(shí)間凍存管傾斜,液體容易流到管口,很容易在后續(xù)的操作中造成污染。具體操作時(shí),凍存管直立起來(lái)放在冰箱里,這樣不容易造成污染。同時(shí)凍存細(xì)胞的時(shí)候,一定加上封口膜,這樣可以避免復(fù)蘇的時(shí)候,水浴箱里的水進(jìn)入蓋子的縫隙中。凍存管外面用封口膜封上后,最好再用白膠布再封一下。這樣可以防止細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),封口膜崩裂,水浴箱中的水進(jìn)入凍存管。
 
  細(xì)胞凍存液的使用注意事項(xiàng):
 
  1.使用前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破壞它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護(hù)效果。
 
  2.在常溫下,DMSO對(duì)人體有害,故在配制時(shí)最好戴上手套操作。
 
  3.混合DMSO要快,因?yàn)镈MSO對(duì)細(xì)胞有毒性,混合之后應(yīng)盡快凍存,提醒各位注意的是加入凍存液后一定要混勻,防止DMSO沉淀。
 
  4.凍存液比例培養(yǎng)基7:血清2:DMSO1,也有將血清比例加大的做法,有的甚至將血清提高到90%,具體濃度視經(jīng)驗(yàn)而定。
 
  5.可以先在泡沫上打孔,把凍存管塞進(jìn)去。這樣降溫可以慢一點(diǎn),當(dāng)然包上棉花也是不錯(cuò)的主意。
 
  6.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時(shí)添加。

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